动物源性食品中的敌百虫、敌敌畏与蝇毒磷样品前处理方法

本文阐述了如何将敌百虫、敌敌畏与蝇毒磷从样品基质中分离提取出来，并经过净化后，转化成液质联用仪可以检测的形式。以提取、净化为重点，依据国标GB 23200.94-2016，为检测人员和相关领域研究人员提供一定的参考。

检测项目：敌百虫、敌敌畏与蝇毒磷

试样的制备与保存

1. 分割肉

取样品中有代表性的约500 g，用组织捣碎机捣碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。

2. 肠衣

取有代表性样品约100 g，用剪刀剪碎至2 毫米以下，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。

3. 蜂蜜

取有代表性样品约500 g，搅拌均匀后装入洁净容器内密封并做好标识。

试样保存与制样要求：分割肉、肠衣、蜂蜜等试样于零下18 ℃ 以下冷冻保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

前处理方法

1.分割肉

准确称取5 g均匀试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞离心管中，加入5 g无水硫酸钠混匀，再加入15 mL二氯甲烷，用均质器（10000 r/min）均质2 min，4000 r/min离心3 min，将有机相转移至100 mL梨形蒸馏瓶中，残渣再用2×10 mL二氯甲烷均质提取两次。离心合并有机相，于40 ℃旋转蒸发至2 mL，将样液转移至5 mL刻度试管中，并用少量二氯甲烷洗涤梨形蒸馏瓶，合并洗涤液到刻度试管中，室温通氮浓缩至干。定量加入1.0 mL乙腈溶解残渣，加入2 mL环己烷旋涡混匀2 min后，2500 r/min离心3 min，将下层乙腈相过0.45 μm微孔滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。

2.肠衣

准确称取5 g试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞离心管中，加入2 g无水硫酸钠混匀，再加入15 mL二氯甲烷，盖上盖混匀，置于超声波清洗器中超声30 min，冷却后将有机相过滤转移至100 mL梨形蒸馏瓶中，残渣再用2×10 mL二氯甲烷混匀超声提取两次，离心合并有机相，于40 ℃旋转蒸发至2 mL，将样液转移至5 mL刻度试管中，并用少量二氯甲烷洗涤梨形蒸馏瓶，合并洗涤液到刻度试管中，室温通氮浓缩至干。定量加入1.0 mL乙腈溶解残渣，加入2 mL环己烷旋涡混匀2 min后，2500 r/min离心3 min，将下层乙腈相过0.45 μm微孔滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。

3.蜂蜜

称取5 g试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞离心管中，加入10 mL水和25 mL乙酸乙酯，于旋涡混合器上混匀1 min，以3000 r/min离心5 min，将上层乙酸乙酯提取液收集于浓缩瓶中，残渣再加入20 mL乙酸乙酯，重复上述操作，合并乙酸乙酯提取溶液。在50 ℃ 以下减压浓缩至约3 mL后转移至10 mL离心管中，用5 mL乙酸乙酯分两次洗涤浓缩瓶，合并洗涤液于离心管中，用氮气吹干。加1.0 mL乙腈溶解残渣，并过0.45 μm微孔滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。

表1  敌百虫、敌敌畏与蝇毒磷信息表